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2025 , Vol. 23 >Issue 1: 122 - 131

DOI: https://doi.org/10.13248/j.cnki.wetlandsci.20230310

Diversity of soil fungi and screening of antifungal strains against crop pathogens in the Zhaling Lake in the source region of the Yellow River

  • Ma Youhai ,
  • Xin Chengwei ,
  • Yang Runyan ,
  • Qi Hexing , *
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Received date: 2023-12-20

  Revised date: 2024-01-31

  Online published: 2026-03-12

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Copyright ©2025 Wetland Science. All rights reserved.
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Abstract

To explore soil fungal diversity in the Zhaling Lake and screen the antifungal strains against crop pathogens, and provide basic materials for subsequent development of biocontrol agents, 11 sediment samples were collected from shoreside of the Zhaling Lake. After being cultured on 7 selective mediums, the fungi were isolated by dilution separation method. The strains were identified by a combination of morphological and molecular biology methods, and the antifungal strains were screened by confront culture method. The results showed that a total of 100 fungi were isolated, belonging to 27 genera including Talaromyces, Alternaria, Cladosporium, Psiloglonium, Fusarium, Phom, Penicillium, Emericellopsis, Epicoccum, Trichurus and Stagonosporopsis etc. Among them, the genera Talaromyces (18 strains) and Alternaria (11 strains) were the dominant genera, and Schizophyllum, Podosordadia, Dothiorella, Radulidium, Trametes, Athelia, Coriolopsis, Geosmithia, Stemphylium, Bipolaris and Aspergillus were the rare genera with only 1 strain. Four highly active antifungal strains were screened belonging to Cladosporium, Emericellopsis, Truncatella and Athelia, they had better inhibitory effect on 8 fungi pathogens isolated from main crops in Qinghai Province. The soil fungi resources in the Zhaling Lake are abundant and the exploitation and utilization values are well.

Cite this article

Ma Youhai , Xin Chengwei , Yang Runyan , Qi Hexing . Diversity of soil fungi and screening of antifungal strains against crop pathogens in the Zhaling Lake in the source region of the Yellow River[J]. Wetland Science, 2025 , 23(1) : 122 -131 . DOI: 10.13248/j.cnki.wetlandsci.20230310

湿地微生物是形成食物链及营养循环的基础，且湿地底泥微生物数量比水体多[1-2]。湿地底泥作为湿地生态系统重要的组成部分，能快速响应环境干扰，在湿地物质循环方面发挥着关键作用。微生物群落状况能反映湿地生态系统的健康状况[3]，因此，湿地微生物已成为当前的研究热点。研究者们对芦苇根际土壤[4]、滨海湿地土壤[5]、红树林湿地[6]和南极半岛不同湖泊湿地土壤[7]真菌多样性进行研究，发现湿地土壤中真菌种类丰富。
在当前全面构建以“绿色”为导向的农业技术体系的背景下[8]，采用生物拮抗菌株进行植物病害防治是国内外研究的热点。从未被开发和利用的自然极端环境微生物群体中筛选拮抗菌株很有可能发现新的抑菌活性菌株，从而为进一步开发新型生物农药提供基础和可能[9-11]。2020年，Saravanakumar和Wang[12]从韩国湿地土壤中分离得到深绿木霉(Trichoderma atroviride)、绿色木霉(Trichoderma virens)、毛簇木霉(Trichoderma velutinum)、哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、黄绿木霉(Trichoderma aureoviride)等9种木霉菌[12]，通过测定这些菌株对壳球孢菌(Macrophomina phaseolina)、禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)和灰葡萄孢霉(Botrytis cinerea)的拮抗活性，发现黄绿木霉菌株的拮抗作用最强，进一步研究发现该菌株能够产生多种抗植物病原真菌的次生代谢产物。
扎陵湖为黄河的过水湖，位于巴颜喀拉山北麓，果洛藏族自治州玛多县西部构造凹地内，是黄河源头众水汇合之地。扎陵湖是青海省高寒湖泊之一，植被丰富，动物种类繁多，是典型的湖泊湿地生态系统，也是三江源自然保护区的核心部分[13-14]。目前，对于黄河源区生物多样性的研究主要集中在对植物和动物的研究方面[13,15-16]，但是扎陵湖真菌多样性及其功能尚不清楚。因此，本研究以扎陵湖土壤真菌为研究对象，分析可培养真菌的多样性，并从中筛选对青海省主要农作物病原真菌具有抑制作用的菌株，以期为后续开发适合青海省高寒地区使用的生防制剂提供基础材料。

1 材料与方法

1.1 材料来源

扎陵湖区多年平均气温为−4 ℃，冬季漫长而寒冷，10月至翌年4月的月平均气温都在0 ℃以下，夏季短而凉爽，最热的7、8月份，月平均气温只有8 ℃左右。扎陵湖平均海拔高于4 294 m，水域面积544.73 km2，东西长约37 km，南北宽约23 km，储水量约49亿m3 [2-3]。
2022年8月上旬，在黄河源区扎陵湖距岸边1 m处，利用小型铁锹采集1~10 cm深度的底泥样本11份，置于500 mL无菌塑料罐中，放入车载冰箱及时带回实验室进行真菌的分离。使用GPS仪记录采样地的海拔和经纬度，记录采样点至岸边50 m范围内的植物种类(表1)。
1 Geographic information of sampling points in the Zhaling Lake

扎陵湖土壤采样点地理信息

样本编号 海拔/m 经纬度 植物种类
Z1 4 302 34°49'27"N, 97°18'38"E 西伯利亚蓼(Polygonum sibiricum)、赖草(Leymus sp.)、委陵菜(Potentilla chinensis)、
垂穗披碱草(Elymus nutans)、棘豆(Oxytropis sp.)、薹草(Carex lasiocarpa)、湿生扁蕾(Gentianopsis paludosa)、麻花秦艽(Gentiana straminea)、亚菊(Ajania sp.)、披针叶黄华(Thermopsis lanceolata)
Z2 4 300 34°49'32"N, 97°16'42"E 西伯利亚蓼、肉果草(Lancea tibetica)、薹草、亚菊、委陵菜、铁棒锤(Potentilla chinensis)、
矮嵩草(Kobresia humilis)、师生扁蕾、棘豆、马蔺(Iris lactea)、麻花青艽、
早熟禾(Poa sp.)、火绒草(Leontopodium sp.)
Z3 4 295 34°50'11"N, 97°13'59"E 垂穗披碱草、西伯利亚蓼、高山嵩草(Kobresia pygmaea)、矮嵩草、冷蒿(Artemisia frigida)、细叶亚菊(Ajania tenuifolia)、龙胆(Radix gentianae)、火绒草(Leontopodium sp.)、麻花秦艽、薹草、紫菀(Radix asteris)、棘豆、翻白委陵菜(Potentilla leuconota)、二裂委陵菜(Potentilla bifurca)、多裂委陵菜
(Potentilla multifida)、马蔺、羽叶垫地梅(Phyllophyllum officinalis)、乳白香青(Anaphalis lactea)
Z4 4 300 34°51'47"N, 97°11'16"E 肉果草、亚菊、马蔺、火绒草(Leontopodium sp.)、矮嵩草、棘豆、西伯利亚蓼、麻花秦艽、
甘青雪灵芝(Ganoderma lucidum)、兔耳草(Lagotis sp.)、绿绒蒿(Meconopsis sp.)
Z5 4 301 34°53'08"N, 97°08'04"E 龙胆、鹅绒委陵菜(Potentilla anserine)、早熟禾、黄花棘豆(Oxytropis ochrocephala)、喉毛花
(Comastoma sp.)、梅花草(Parnassia sp.)、青藏虎耳草(Saxifraga przewalskii)、易穗薹草(Carex heterostachya)、细叶亚菊、麻花秦艽、火绒草(Leontopodium sp.)、
盐地凤毛菊(Saussurea salsa)、乳白香青(Anaphalis lactea)、
双叉细柄茅(Ptilagrostis dichotoma)、肉果草、紫菀
Z6 4 304 34°49'32"N, 97°23'08"E 西伯利亚蓼、水麦冬(Triglochin palustre)、赖草、嵩草(Kobresia sp.)、披针叶黄华
Z7 4 305 35°00'23"N, 97°13'01"E 西伯利亚蓼
Z8 4 304 35°00'53"N, 97°16'46"E 西伯利亚蓼、赖草、细叶亚菊、薹草、披针叶黄华、狗娃草(Heteropappus hispidus)、
二裂委陵菜、灰黎(Chenopodium album)
Z9 4 305 35°01'02"N, 97°17'49"E 早熟禾、委陵菜、紫蒿(Erigeron breviscapus)、马蔺、恰草(Koeleria cristata)、
狗娃草、针茅(Stipa sp.)、垂穗披碱草、高山嵩草、梭罗草(Roegneria thoroldiana)、细叶亚菊、
异叶青兰(Dracocephalum heterophyllum)、薹草、西伯利亚蓼
Z10 4 309 35°01'36"N, 97°20'25"E 西伯利亚蓼
Z11 4 310 35°00'19"N, 97°30'34"E 西伯利亚蓼

1.2 培养基

根据参考文献[17-18]中的方法进行培养基的配制。(1)马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)：马铃薯200 g、葡萄糖20 g、琼脂18 g、蒸馏水1000 mL。(2)察氏培养基：蔗糖20 g、K2HPO4 1 g、MgSO4 0.5 g、FeSO4 0.01 g、NaNO3 3 g、KCl 0.5 g、琼脂18 g、蒸馏水1 000 mL。(3)麦芽汁培养基：麦芽浸膏50 g、葡萄糖5 g、琼脂18 g、蒸馏水1 000 mL。(4)湖水马铃薯葡萄糖琼脂培养基：使用龙羊峡水库湖水替换PDA培养基中的蒸馏水。(5)沙氏培养基：葡萄糖40 g、琼脂18 g、蛋白胨10 g、蒸馏水1 000 mL。(6)马丁氏培养基：KH2PO4 1 g、葡萄糖10 g、MgSO4·7H2O 0.5 g、蛋白胨5 g、1/3 000 孟加拉红100 mL、琼脂18 g、蒸馏水1 000 mL。(7)土壤浸提液培养基：使用土壤浸提液替换PDA培养基中的水。取500 g底泥加入能浸提出1 000 mL浸出液的水中，121 ℃灭菌15 min，冷却后，滤纸过滤，即得土壤浸提液。培养基经121 ℃高压灭菌20 min后保存备用。

1.3 靶标病原菌

8种靶标病原菌为青海省主要农作物玉米(Zea mays)、青稞(Hordeum vulgare var. coeleste)和小麦(Triticum aestivum)叶斑病菌，分别为分离自玉米的大斑病菌(Exserohilum turcicum)、链格孢叶斑病菌(Alternaria alternata)、麦根腐平脐蠕孢叶斑病菌(Bipolaris sorokiniana)、玉米圆斑病菌(Bipolaris zeicola)；分离自青稞的条纹病菌(Drechslera graminea)；分离自小麦的麦根腐平脐蠕孢叶斑病菌(Bipolaris sorokiniana)、链格孢叶斑病菌(Alternaria sp.)和赤霉病菌(Fusarium graminearum)。于2020—2022年在青海大学植物保护实验室进行病原菌的分离、鉴定和保藏[19-21]。

1.4 扎陵湖土壤真菌的分离、纯化及保藏

土壤样本在室内晾干后，首先使用灭菌研钵进行研磨，然后使用100目筛子过滤掉砂石和大的土壤颗粒。准确称取1 g土样放入盛有100 mL无菌水的三角瓶中，置于25 ℃摇床，150 rpm转速振荡30 min。在操作台内将400 μL土壤悬液均匀涂板至9 cm、含0.1%氨苄青霉素的7种选择性培养基平板上，每种培养基3个重复平板。置于霉菌培养箱25 ℃恒温培养5 d后，挑取单菌落至PDA平板继续培养。若菌落不纯则采用菌丝尖端纯化法纯化，直至长出单菌落[22]。采用滤纸片保存法−20 ℃保藏土壤真菌[23]。

1.5 扎陵湖土壤真菌的鉴定

1.5.1 形态学鉴定

将纯化保藏的菌株活化至PDA平板上，25 ℃培养6 d。使用0.5 cm打孔器取得菌饼后接种至PDA平板，25 ℃培养7 d，观察菌落和分生孢子形态。每株菌株3个重复，且培养基厚度一致。菌株形态学鉴定参照《中国真菌总汇》[24]。

1.5.2 分子生物学鉴定

采用CATB法提取基因组DNA[20]，DNA用25 μL三羟甲基氨基甲烷-乙二胺四乙酸/核糖核酸酶(TE/RNase)溶解沉淀，−20 ℃保存备用。内转录间隔区1扩增引物为 ITS1(5′-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3′)和ITS4(5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′)[25]。聚合酶链反应(PCR)体系和程序参照祁鹤兴等[22-24]的方法。PCR扩增产物送至北京擎科新业生物技术公司使用3730xl基因测序仪进行双向测序。使用MAFFT软件对正反向序列进行拼接，拼接序列用MEGA V.6.0.6 软件进行校正。使用PAUP* v. 4.0 alpha软件构建系统发育树，采用启发式算法(heuristic searches)进行运算。以致病疫霉Phytophthora infestans 176[基因库(GenBank)登录号为AF339424]作为外群，运算重复1000次。100株土壤真菌GenBank登录号为OR884124-OR884223。31株参照菌株序列下载自美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库(https://www.ncbi.nlm.nih.gov)。

1.6 扎陵湖土壤抑菌活性真菌菌株的筛选

采用皿内对峙培养法[26]，筛选对青海省主要农作物小麦、玉米和青稞的8种病原真菌具有抗菌活性的拮抗菌株。土壤真菌和8种供试靶标病原菌在PDA培养基上培养6 d，用0.5 cm打孔器取得菌饼，将靶标菌和土壤真菌分别反贴至9 cm培养皿两侧，距边沿1 cm处，每个菌株3个重复。以接种靶标菌的培养皿为对照，待对照长满培养皿时测量抑菌带的宽度。

2 结果与分析

2.1 扎陵湖土壤真菌多样性

从黄河源区扎陵湖11份底泥样本中共计分离得到100株真菌。其中，从沙氏培养基中分离得到34株，从马丁氏培养基上分离得到25株，从察氏培养基上分离得到16株，从PDA和湖水培养基上各分离得到12株，从麦芽汁培养基上分离得到1株，从土壤浸提液培养基上未分离得到菌株。
经形态学和分子生物学鉴定发现100株菌株分别属于27属(图1)。其中，蓝状菌属(Talaromyces)的分离个数最多，为18株，其次为链格孢属(Alternaria)，为11株；枝孢霉属(Cladosporium)和无垫船壳菌属(Psiloglonium)都为7株；镰刀菌属(Fusarium)和茎点霉属(Phoma)均为6株；青霉属(Penicillium)菌株为5株；翅孢壳属(Emericellopsis)、附球壳属(Epicoccum)、毛束霉属(Trichurus)和拟壳多孢属(Stagonosporopsis)均为4株；枝顶孢属(Acremonium)、小球腔菌属(Leptosphaeria)和截平盘孢属(Truncatella)都为3株；异茎点霉属(Paraphoma)和Nothophoma均为2株；其余11属裂褶菌属(Schizophyllum)、柄粪壳属(Podosordaria)、穴壳菌属(Dothiorella)、钝齿霉属(Radulidium)、栓菌属(Trametes)、阿太菌属(Athelia)、拟革盖菌属(Coriolopsis)、Geosmithia、葡柄霉属(Stemphylium)、平脐蠕孢属(Bipolaris)和曲霉属(Aspergillus)分离个数最少，均为1株。27属真菌菌落及其显微形态特征差异较大(图2)，如翅孢壳属、枝顶孢属和Geosmithia真菌菌落颜色较浅，呈白色或浅灰色，且Geosmithia菌落较为干燥，略呈粉末状。镰刀菌属真菌菌落呈绒毯状，玫瑰红色，附球壳属真菌菌落呈毡状，橘红色。从14属真菌都观察到典型的分生孢子，如枝孢霉属孢子具0~3个隔膜，球形，卵形或棍棒形，浅褐色至深褐色；链格孢属具横、纵隔膜，褐色的分生孢子；镰刀菌属具卵形或圆形的小型分生孢子和1~5个隔膜的大型分生孢子；附球壳属具圆形或卵圆形，0~1个隔膜，呈黄褐色的分生孢子；青霉和蓝状菌属具扫帚状分支的分生孢子梗；茎点霉属、Podosordaria和Nothophoma具卵形、色浅的分生孢子。平脐蠕孢属和Psiloglonium观察到圆形或卵形的厚垣孢子。其余11属真菌在同等条件下未观察到任何孢子。
1 Species and numbers of fungi isolated from sediments in the Zhaling Lake

扎陵湖土壤真菌种类及分离个数

2 Colonies and micromorphologic characteristics of fungi isolated from sediments in the Zhaling Lake

扎陵湖土壤真菌菌落及其显微形态特征

2.2 扎陵湖土壤真菌系统发育分析

根据扎陵湖土壤真菌形态学特征和rDNA-ITS序列分析结果，合并形态和序列相同的菌株，选取34株代表菌株，以在NCBI公布rDNA-ITS序列的31株菌株作为参照菌株，构建系统发育树，确定土壤真菌的分类地位(图3)。34株代表菌株和31株参照菌株以大于78%的支持率被分为24个分支。菌株ZP10-6和ZC4-30分别与交链格孢(Alternaria alternata)和极细链格孢(Alternaria tenuissima)聚为1个系统发育分支，亲缘关系最近，且它们与菌株ZC8-13、小球腔菌属真菌(Leptosphaeria sclerotioides)聚为1个大分支。菌株ZP11-3、ZS3-10和ZM9-5分别与串珠镰刀菌(Fusarium verticillioides)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)和黑附球菌(Epicoccum nigrum)聚为1个分支，并组成1个大分支。菌株ZM4-1、ZM7-3和ZH10-13分别与青霉属真菌Penicillium pimiteouiense、奥尔森氏青霉(Penicillium olsonii)和Penicillium mirabilis聚为1个分支，菌株ZS2-10和ZP11-5与蓝状菌属真菌Talaromyces purpureogenus聚在1个分支。菌株ZH7-7、ZC4-31和ZP6-9分别与茎点霉属真菌(Phoma sp.)、拟壳多孢属真菌(Stagonosporopsis sp.)和钝齿霉属真菌(Radulidium subulatum)聚在一起，并组成1个大分支。其余菌株与亲缘关系最近参照菌株都单独组成分支。
3 Plylogenetic tree of represent fungi isolated from sediments in the Zhaling Lake based on rDNA-ITS sequences

基于rDNA-ITS序列构建的扎陵湖土壤真菌代表菌株系统发育树

2.3 扎陵湖底泥抑菌菌株的筛选

通过测定100株扎陵湖底泥真菌对来源于青海省主要农作物青稞、小麦和玉米的8种病原真菌的抑菌效果，共筛选得到48株具有抑菌作用的菌株(表2)。对玉米麦根腐平脐蠕孢叶斑病菌具有抑菌作用的菌株数量最多，为34株；对玉米圆斑病菌和小麦麦根腐平脐蠕孢叶斑病菌具有抑菌效果的菌株分别为28株和23株；对玉米链格孢叶斑病菌和大斑病菌具有抑菌效果的菌株有18株和15株；对小麦赤霉病菌具抑菌作用的菌株最少，只有8株。通过分析土壤真菌对病原菌抑菌带的大小，发现有10株土壤真菌对小麦麦根腐平脐蠕孢叶斑病菌的抑菌带在≥5~10 mm之间；有10株土壤真菌对玉米圆斑病菌的抑菌带在≥10~15 mm之间。抑菌带≥15 mm的菌株中，对玉米麦根腐平脐蠕孢叶斑病菌具有抑菌效果的菌株最多，为16株，对小麦赤霉病菌具有抑菌效果的菌株最少，为2株。
2 Antimicrobial activity analysis of soil fungi from the Zhaling Lake

扎陵湖土壤真菌抑菌活性分析

病原菌抑菌菌株总数/个≥5~10 mm的抑菌菌株数/个≥10~15 mm的抑菌菌株数/个≥15 mm的抑菌菌株数/个
青稞条纹病菌12324
小麦赤霉病菌8232
小麦麦根腐平脐蠕孢叶斑病菌231054
小麦链格孢叶斑病菌12903
玉米链格孢叶斑病菌18755
玉米圆斑病菌288108
玉米麦根腐平脐蠕孢叶斑病菌349816
玉米大斑病菌15145
100株菌株中有4株菌株对8种病原菌具有广谱抗菌活性(表3和图4)，其中菌株ZS9-10和ZS5-3对8种病原菌的抑菌带都≥15 mm。菌株ZS9-10对小麦链格孢叶斑病菌的抑菌效果最好，抑菌带为27.5 mm，菌株ZS5-3对玉米链格孢叶斑病菌抑菌效果最好，抑菌带为25.5 mm。菌株ZS1-10对玉米圆斑病菌的抑菌效果最好，抑菌带为20.0 mm，对青稞条纹病菌、小麦链格孢叶斑病菌和玉米链格孢叶斑病菌的抑菌效果较差，抑菌带均为8.5 mm。菌株ZM8-3对玉米麦根腐平脐蠕孢叶斑病菌的抑菌效果最好，抑菌带为26.0 mm，对小麦链格孢叶斑病菌的抑菌效果最差，抑菌带为5.0 mm。
3 Inhibition zones of 4 highly active antifungal strains against crop pathogens in soils of the Zhaling Lake (Unit: mm)

扎陵湖土壤4株高抑菌活性真菌对作物病原菌的抑菌带(单位：mm)

菌株编号 属 青稞条纹
病菌		 小麦赤霉
病菌		 小麦麦根腐平脐
蠕孢叶斑病菌		 小麦链格
孢叶斑病菌		 玉米链格
孢叶斑病菌		 玉米圆斑
病菌		 玉米麦根腐平脐
蠕孢叶斑病菌		 玉米大斑
病菌
ZS9-10 枝孢霉属 23.0 15.0 25.0 27.5 27.4 27.3 23.5 15.0
ZS5-3 截平盘孢属 24.5 17.0 25.0 20.0 25.5 18.0 22.5 17.5
ZS1-10 翅孢壳属 8.5 13.5 13.5 8.5 8.5 20.0 12.0 9.0
ZM8-3 阿太菌属 15.0 7.0 15.0 5.0 12.5 16.0 26.0 12.5
4 Antibacterial effects of soil fungi from the Zhaling Lake on different pathogens

扎陵湖土壤真菌对不同病原菌的抑菌效果

3 讨　论

扎陵湖是黄河源区的第二大淡水湖，是由断陷盆地形成的构造湖。与其东部的鄂陵湖一山之隔，相距十多公里，拥有巨大的水源涵养能力[13]。2000年青海省政府基于对三江源自然保护区战略地位和生态作用的考量，批准建立三江源自然保护区，开始保护三江源生态环境，至2011年国务院批准三江源区建立，湿地保护一直是三江源自然保护区生态保护和总体规划建设的内容之一。但黄河源区乃至三江源区面临的挑战与问题依然存在，如湿地生态整体退化趋势未得到根本遏制，自然条件和技术制约依然严重，生态保护和民生改善矛盾突出等[27]。因此，加紧对中国独有的4000 m海拔以上高寒高海拔湖泊湿地真菌资源背景开展研究刻不容缓。
本研究采用7种选择性培养基进行土壤真菌的分离，发现从沙氏培养基中分离得到的真菌最多，从麦芽汁培养基上分离得到的真菌最少，仅为1株。从土壤浸提液培养基上未分离得到菌株。因此，沙氏培养基为扎陵湖湿地土壤真菌分离的最适培养基。许莉等[28]采用8种选择性培养基从漳江口红树林沉积物中分离得到274株真菌，发现PDA、察氏培养基和沙氏培养基的分离效果较好。姜喜铃等[17]使用6种选择性培养基从兰科药用植物手参原球茎中分离共生真菌，发现PDA培养基的分离效果也较好。
从扎陵湖土壤中分离得到的100株真菌分别属于27属，表明扎陵湖土壤真菌种类比较丰富。徐婧等[6]对广东和海南红树林湿地真菌多样性进行研究，发现3个中国新记录种。Ogaki等[7]从南极半岛不同湖泊湿地土壤中分离得到的195株真菌，分别属于子囊菌门(Ascomycota)、担子菌门(Basidiomycota)和被孢霉门(Mortierellomycota)，且在属水平上真菌多样性和丰富度指数较高。本研究结果结合已有研究报道表明，极端环境下土壤真菌种类丰富。
从扎陵湖土壤100株真菌中筛选得到48株具有抑制作物病原真菌活性的菌株，并从中筛选得到4株对8种病原真菌均具有抑菌效果的真菌，其中2株菌株对8种病原菌的抑菌带都≥15 mm。4株高活性抑菌菌株分别属于枝孢霉属、截平盘孢属、翅孢壳属和阿太菌属。研究表明，从南极半岛湖泊湿地土壤中分离得到的枝孢霉属真菌具有抗真菌活性[7]；毛花猕猴桃内生芽枝状枝孢霉(Cladosporium cladosporioides)对麦根腐平脐蠕孢病菌、胶孢炭疽菌(Colletotrichum collosporum)、核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)、腐皮镰刀菌(Fusarium solani)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)和葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)等8种病原菌具有抑制作用[29]。翅孢壳属[30]真菌广泛分布于陆地和水体环境中，可以产生一系列已知的生物活性代谢物，对植物和人类病原菌具有抗菌活性，并具有抗癌活性。截平盘孢属[31]和阿太菌属[32]真菌可以产生多种活性物质，也具有较好的抑菌活性。因此，筛选得到的高活性抑菌菌株可以作为后续生防制剂开发的候选菌株。

4 结　论

本研究初步查明黄河源区扎陵湖土壤真菌多样性，筛选得到4株对8种青海省主要农作物病原真菌具有广谱抑菌活性的潜在生防菌珠，4株高效抑菌活性菌株分别为枝孢霉属、截平盘孢属、翅孢壳属和阿太菌属真菌。研究结果丰富了高寒湖泊湿地土壤真菌多样性及微生物制剂开发资源。未来仍需继续探索自然条件下高寒区湖泊湿地真菌多样性及功能。

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